支原体污染作为一种常见的细胞培养污染物,因其难以察觉的特性,往往给科研人员带来不小的困扰。为了应对这一挑战,中乔新舟LAMP支原体快检试剂盒,革新登场!
该试剂盒以其高效、便捷、准确的特点,成为广大科研工作者手中的得力助手。本试剂盒基于环介导等温扩增技术(LAMP),专为细胞培养物中支原体污染检测开发。突破传统PCR检测限制,可在65℃恒温条件下1小时完成检测,无需复杂热循环设备。闭管检测0气溶胶,杜绝二次污染风险。
【五大核心优势,颠覆传统检测】
极速高效:LAMP等温扩增技术,1小时完成检测全程
设备自由:水浴锅/金属浴/PCR仪通用,无需昂贵仪器
精准抗干扰:严选Warmstart酶,室温配液强耐抑制剂,零假阳性
广谱覆盖:横扫95%污染源(包括Mycoplasma arginini、Mycoplasma orale、Mycoplasma fermentans、Mycoplasma hominis、Mycoplasma hyorhinis 等高发菌型)
安全无忧:闭管显色设计,核酸污染风险归零
【全场景适配,精准护航】
细胞类型:肿瘤/干细胞/原代/免疫细胞→悬浮贴壁通用
应用领域:疫苗开发、生物制药、细胞治疗→从研发到质控全链路保驾
实验室常规监测:细胞房污染溯源、培养基质量验证
【三步终结焦虑,小白也能上手】
裂解(15分钟) → 扩增(65℃恒温1h) → 判读(蓝=阳性,紫=阴性)
【操作步骤】
1. 样品处理
通常当细胞达到下次传代或换液时,即可吸取上清进行检测。若细胞传代周期短,建议分瓶,1瓶用于正常细胞培养,另外1瓶不传代不换液,培养细胞至3天以上,此时支原体含量较高,便于检出。贴壁细胞建议汇合度达到90%左右。
贴壁细胞取样:直接吸取上清;
悬浮细胞取样:2,300 rpm或500 g 离心5 min后,吸取上清。
2.反应体系配制
将Quick mycoplasma detection kit by LAMP从-20~-80℃储存条件下拿出,恢复至室温,混匀后离心。根据实验样品(包括PositiveControl,PC;Negative Control, NC;待测样品unk.)数量配制反应体系,每管分装 19μL:
【注】:“n”是实验样品数量。
3. 加样
向分装好的 19μL反应体系中加入样品:
加入样品后,混匀离心。如果后续在水浴锅/金属浴中反应:加入Mineral oil,25μL/管;如果在 PCR 仪中反应,反应程序中设置热盖105℃,无需加入Mineral oil。
4.反应
将仪器温度设置成65℃,放入反应管,孵育 60 min。
可选步骤:在65℃反应结束后,增加85℃ 5min,以灭活Bst DNA聚合酶,减少气溶胶污染的可能性。
5.结果判断
反应结束后,立即拿出,在光线良好的条件下观察管子颜色。优先观察Negative
Control(NC)和 Positive Control (PC)的颜色,若颜色不正确,则需要查找原因后确定下一步计划。
紫色:阴性
蓝色:阳性
[注]:
1.如果颜色介于紫色和蓝色之间,可以将反应管继续65℃条件下延长总反应时间至75~90 mins。若依然为中间色,则判断阴性; 若颜色完全变为蓝色,则判为阳性。
2. Lamp 反应会产生大量的核酸,请勿在反应结束后打开管盖,避免气溶胶的污染。
中乔新舟支原体快检试剂盒——快·准·稳,让隐患现形于未然!
中乔新舟支原体快检黑科技——1小时快速锁定污染源!
作者:上海中乔新舟生物科技有限公司 2025-05-20T00:00 (访问量:1184)
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